The action mechanism of prokaryotic FAD synthetases as a potential drug target for the treatment of bacterial infections

Las FAD sintetasas bacterianas (FADS) son enzimas bifuncionales y bimodulares cuya función es producir los cofactores esenciales FMN y FAD a partir de Riboflavina (RF o vitamina B2). Estas proteínas se organizan en dos módulos casi independientes, cada uno de los cuales lleva a cabo una de las actividades mediante las cuales se sintetizan FMN y FAD. El módulo C-terminal transforma RF en FMN mediante una actividad riboflavin quinasa, mientras que el módulo N-terminal cataliza la actividad FMN:adenililtransferasa que transforma el FMN en FAD. Debido al carácter esencial de los cofactores FMN y FAD y a las diferencias entre FADSs bacterianas y las correspondientes enzimas de mamíferos (sobre todo entre el módulo FMNAT de las enzimas bacterianas y las enzimas que transforman FMN en FAD en mamíferos), estas enzimas son potenciales dianas terapéuticas. Por este motivo, merece la pena profundizar en el estudio de las FADs bacterianas, en la comprensión de sus ciclos catalíticos y de sus estrategias regulatorias, centrándonos en las diferencias entre diferentes miembros de esta familia.Por lo tanto, durante el desarrollo de la presente tesis doctoral hemos abordado lossiguientes proyectos:- Estudio de los determinantes estructurales que modulan el equilibrio de oligomerización de la FADS del organismo Corynebacterium ammoniagenes (CaFADS). CaFADS estabiliza durante sus ciclos catalíticos distintos ensamblados oligoméricos, siendo especialmente relevante la formación de un hexámero compuesto por un dímero de trímeros. En esta estructura los protómeros adoptan unadisposición cabeza-cola, lo que sugiere que el dímero de trímeros podría tener un papel activo en la canalización del FMN desde el sitio RFK hasta el sitio FMNAT, donde será transformado en FAD. Para validar esta hipótesis, producimos y caracterizamos mutantes puntuales localizados en la interfase entre protómeros. Aparentemente, los residuos mutados estabilizaban el dímero de trímeros mediante la formación de puentes salinos, interacciones de Van der Waals o interacciones hidrófobas con residuos localizados en el módulo opuesto del protómero adyacente en cada trímero. Nuestros resultados revelaron que todas las variantes eran activas y capaces de estabilizar estructuras cuaternarias, aunque la mayoría de ellas muestran alteradas sus actividades RFK y FMNAT, así como los parámetros de interacción con los ligandos y la tendencia a la oligomerización. Mención especial requiere el hecho de que mutaciones localizadas en el módulo RFK modulaban la actividad FMNAT y viceversa. Estos resultados sólo pueden explicarse en el marco del dímero de trímeros, en el que residuos de diferentes módulos están en estrecho contacto. Estos resultados validan la hipótesis de la formación de estructuras oligoméricas, en las que los protómeros adoptan una disposición cabeza-cola, durante los ciclos catalíticos de CaFADS. Además, nuestros estudios permiten determinar el papel de residuos concretos en las actividades RFK y FMNAT de esta enzima.- Estudio comparativo de los ciclos catalíticos RFK y FMNAT de las FADSs de los organismos C. ammoniagenes y Streptococcus pneumoniae (CaFADS y SpnFADS, respectivamente). A pesar de las similitudes generales entre FADSs bacterianas, enzimas de diferentes organismos muestran importantes diferencias funcionales. El estudio de estas disparidades puede proporcionar las herramientas adecuadas para el diseño de compuestos selectivos de especie, que sean capaces de neutralizar un organismo específico mediante la inhibición selectiva de su FADS, sin afectar la flora del huésped. Este es el caso de CaFADS y SpnFADS, que muestran gran homología estructural pero importantes diferencias en sus actividades. En este proyecto hemos llevado a cabo una primera caracterización funcional de SpnFADS, identificando tres importantes diferencias respecto a CaFADS. De este modo y contrariamente a CaFADS, SpnFADS i) no estabiliza el dímero de trímeros, ii) su actividad FMNAT requiere condiciones reductoras fuertes, y iii) la actividad RFK de SpnFADS no muestra inhibición por el sustrato RF. Asimismo, un estudio más detallado de la actividad RFK de ambas enzimas nos permitió identificar los determinantes cinéticos y termodinámicos responsables de las citadas diferencias. La integración de nuestros datos experimentales y su interpretación en el marco de las estructuras cristalográficas disponibles, ha arrojado luz sobre las diferentes estrategias reguladoras adoptadas por estas dos enzimas.- Desarrollo de nuevos fármacos antibacterianos contra FADSs bifuncionales. Debido a la irrupción durante las últimas décadas de cepas bacterianas resistentes a antibióticos, la necesidad de nuevas dianas terapéuticas antibacterianas, así como de fármacos dirigidos contra ellas ha quedado manifiesta. De este modo, y debido a su carácter esencial, junto a otras características deseables, proponemos a las FADS procariotas como dianas terapéuticas explotables durante el proceso de búsqueda de nuevos antibióticos. En este proyecto hemos optimizado un protocolo para la identificación de potenciales inhibidores de estas enzimas, utilizando como modelo CaFADS. Posteriormente hemos utilizado esta metodología para identificar compuestos que podrían ser utilizados como drogas de amplio espectro o selectivas de especie. Nuestro protocolo comienza con la identificación de potenciales inhibidores mediante un cribado de alto rendimiento, basado en las actividades enzimáticas de la proteína y la consiguiente identificación de la actividad inhibida. Los mejores inhibidores de la actividad FMNAT (ya que es más probable que estos compuestos no afecten a las enzimas de mamíferos) fueron estudiados más detalladamente y sus mecanismos de inhibición determinados. Paralelamente, se comprobó el efecto bacteriostático de los compuestos identificados mediante el cribado en diferentes cepas bacterianas. En este proyecto hemos identificado compuestos prometedores que podrían usarse como inhibidores selectivos de la FADS de un organismo en concreto, y otros que podrían desarrollarse como fármacos de amplio espectro.<br /

Estudio retrospectivo en historias clínicas de nifedipino versus sulfato de magnesio como agente tocolítico del hospital Víctor Ramos Guardia de Huaraz durante el periodo Enero - Diciembre 2013

La amenaza de Parto Prematuro es una de las patologías más peligrosas tanto para la gestante como para el producto neonatal, siendo la solución el retardo de la culminación de la gestación mediante tratamiento tocolítico y así prevenir enfermedades neonatales graves. El agente tocolítico ideal debe ser específico para la vía común del parto, fácil de administrar, económico, efectivo para prevenir el parto prematuro, y capaz de mejorar los resultados perinatales por sus menores efectos adversos maternos, fetales y neonatales Objetivo: Comparar la eficiencia y seguridad del uso de Nifedipino versus el uso de Sulfato de Magnesio como agente tocolítico. Método: Se trata de un estudio comparativo retrospectivo, observacional, analítico y longitudinal en historias clínicas de pacientes gestantes con diagnóstico de amenaza de parto prematuro del Hospital Víctor Ramos Guardia de Huaraz – Perú. Se analizaron 226 historias clínicas, se dividieron en 2 grupos, grupo tratado con Nifedipino (113 pacientes) y el otro con Sulfato de Magnesio (113 pacientes), tomamos los valores de inicio de efecto tocolítico y número de efectos adversos para cada grupo. Resultados: Se encontró que de las 113 pacientes del grupo de Nifedipino, 82 respondieron o tuvieron un tiempo de inicio del efecto tocolítico menor a 20 minutos, mientras que en el grupo de Sulfato de magnesio el inicio de efecto tocolítico se produjo entre los 21 y 60 minutos, antes de los 20 minutos no se encontraron pacientes. En cuanto número de efectos adversos, se encontró que la mayoría de los pacientes el grupo tratado con Nifedipino presentaron entre 1 y 2 efectos adversos, siendo menores en cantidad comparados con el número de efectos adversos presentados en el grupo tratado con Sulfato de Magnesio, que fueron de 2 a 4 efectos adversos. Conclusiones: El Nifedipino tiene un tiempo de inicio de efecto tocolítico menor que el Sulfato de Magnesio por lo que se considera más eficaz el uso de Nifedipino como tocolítico comparado con el uso del Sulfato de Magnesio. Además el Nifedipino tiene un número de efectos adversos menor al Sulfato de Magnesio con lo cual se demuestra que el Nifedipino es más seguro que el Sulfato de Magnesio como tocolítico.Threatened preterm labor is one of the most dangerous pathologies for the mother or her product, been the solution to that, the delay of the gestation ending through tocolytic treatment, so that severe neonatal diseases could be prevented. The tocolytic agent must be specific to the common delivery way, easy to administrate, economic, effective to prevent preterm labor, and capable of improving the perinatal outcomes with less adverse effects to the mother, the fetus or the newborn. Objective: To compare efficiency and safety in the use of Nifedipine versus Magnesium Sulfate as a tocolytic agent. Method: This is a comparative, retrospective, observational, analytic and longitudinal study on pregnant patient’s medical records diagnosed of threatened preterm labor from Victor Ramos Guardia Huaraz Hospital - Peru. We analyzed 226 medical records, we divided the sample into two groups, the one treated with Nifedipine (113 patients), and the other one treated with Magnesium Sulphate (113 patients), we registered mother's chronological age at presentation, mother's gestational age at presentation, onset of the tocolytic effect, and number of adverse effects for each group Results: We found that,.from 113 patients on the Nifepidine group: 82 respond or had an onset time of the tocolytic effect less than 20 minutes, while in the Magnesium Sulphate group had an onset time of the tocolytic effect between 21 and 60 minutes, plus none patients were found with less than 20 minutes. As for the number of adverse effects on each group, the most of the patients in the group treated with Nifedipine presented 1 or 2 adverse effects, been less in quantity when compared to the number of adverse effects presented on the group treated with Magnesium Sulphate, which were from 2 to 4 adverse effects. Conclusions: Nifedipine has a shorter onset time of the tocolytic effect than Magnesium Sulphate, ergo it is consider to be more efficient the use of Nifedipine instead of Magnesium Sulphate as a tocolytic agent. Also, Nifedipine has less adverse effects than Magnesium Sulphate, ergo it was demonstrated that Nifedipine is safer than Magnesium Sulphate as a tocolytic agent.Tesi

Modificaciones en la imagen social de la Enfermería como resultado de la experiencia en contexto de pandemia : Investigación cualitativa a desarrollarse con la población joven de Córdoba Capital, durante el segundo semestre del 2022

La imagen social mayormente negativa del personal de enfermería en Argentina está basada en la desinformación: una imagen pobre, cargada de poca independencia profesional, escaso nivel académico, subordinada a los médicos, vinculada más con el quehacer religioso y femenino que el profesional, con pocas oportunidades y mala remuneración, con malas condiciones de trabajo y poco atractiva para los jóvenes al momento de optar por una carrera. Las diversas variables que se pusieron en juego durante la pandemia del CoVid-19, implicaron un notorio desplazamiento de los distintos roles y funciones de los trabajadores de la salud. Como consecuencia, existe la posibilidad de que se hayan generado movimientos y modificaciones en el imaginario social de la población, los cuales se propone relevar el presente trabajo. El estudio se focalizará en caracterizar las modificaciones en la imagen social de la profesión de enfermería, como resultado de la experiencia en el contexto de pandemia, de la población joven entre los 15 a 24 años de Córdoba Capital durante el segundo semestre del 2022. A través de una investigación cualitativa con enfoque de interaccionismo simbólico, que toma como variable en estudio “modificaciones en la imagen social de la profesión de enfermería, como resultado de la experiencia en contexto de pandemia”, se plantean las dimensiones visión de la Enfermería, concepciones sobre las competencias y la formación de los enfermeros, con sus respectivas subdimensiones: prenociones sobre la enfermería, imágenes frente al contexto actual, influencia de la vivencia personal; incumbencias, roles y actividades; niveles académicos, del ejercicio y títulos habilitantes. Se proponen técnicas de recolección y análisis de datos tales como: entrevistas, discusiones de grupos focales, cuadernos de campo y grabación de voz. Tales instrumentos nos brindarán información acerca de las dimensiones de interés. Este proyecto se estructura en capítulos: Capítulo 1, “Introducción”, donde se realiza un análisis de la realidad que conlleva al planteo y definición del problema a investigar, se realiza la justificación correspondiente y mediante la búsqueda de información se confecciona el marco teórico, los objetivos, la conceptualización de la variable y dimensiones de la misma. Capítulo 2, “Encuadre metodológico”, donde se indica el diseño utilizado para el desarrollo de éste. Se expresará la operacionalización de la variable, el tipo de estudio y, la técnica e instrumento utilizados para su realización. Se especifican también las herramientas y procesos posibles de aplicar para la recolección, procesamiento, presentación y análisis de los datos obtenidos.Fil: Medina Uñates, Milagros. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Escuela de Enfermería; Argentina.Fil: Minuzzi, María Milagros. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Escuela de Enfermería; Argentina

Desintegración familiar e inteligencia emocional en estudiantes de cuarto y quinto de secundaria de una Institución Educativa

El presente trabajo de investigación titulado “Desintegración Familiar e Inteligencia Emocional en estudiantes de cuarto y quinto de secundaria” tiene como finalidad determinar la relación que existe entre la desintegración familiar y la inteligencia emocional en los estudiantes de una institución educativa; con una muestra compuesta por 100 estudiantes del cuarto y quinto grado de secundaria entre 14 y 16 años de edad. Se aplicó dos instrumentos de medición: EQi-YV BarOn Emotional Quotient Inventory para inteligencia emocional y el cuestionario para medir la desintegración familiar de Durand Correa. Se determinó a través del análisis estadístico que existe una correlación negativa baja entre las variables

Gestión de capacitación y desarrollo de competencias laborales de los trabajadores de una dirección de salud en Apurímac, 2022

El trabajo de investigación tuvo como objetivo determinar la relación entre la gestión de capacitación y el desarrollo de competencias laborales de los trabajadores de una dirección de salud en Apurímac, 2022. La investigación fue de tipo aplicada, con diseño no experimental, de corte transversal, correlacional. La población estuvo conformada por el personal de la entidad de estudio. La población estuvo constituida por 150 trabajadores La técnica utilizada para la recolección de información fue la encuesta y el instrumento fue el cuestionario cuya medición de las variables gestión de capacitación estuvo conformado por 20 ítems y desarrollo de competencias laborales por 22 ítems. Alfa de Cronbach para el ítem gestión de capacitación (α = 0.959) y desarrollo de competencias laborales (α = 0.9198), que se determinó que la encuesta tiene una alta confiabilidad. Se utilizó el software estadístico SPSS versión 25 para procesamiento de datos. Los resultados descriptivos referente al nivel de gestión de capacitación, determinaron que el 60.6% de los encuestados, percibieron que el nivel es regular, el 38.5% señalaron un nivel eficiente, y el 9% el nivel deficiente, así mismo la aprueba bilateral con el estadígrafo de Rho de. Spearman para la hipótesis General fue de 0.747 y una Sig. (Bilateral)= 0,000 lo que corresponde a una correlación positiva alta. De la información obtenida se concluye que a medida que la gestión de capacitación mejore, también mejorara el desarrollo de competencias laborales de los trabajadores de la institución considerado para el estudio

Determinación del efecto Antimicrobiano in Vitro del Extracto de Equisetum giganteum L. (Cola de Caballo) sobre el crecimiento de Staphylococus aureus, Escherichia coli y Candida albicans, Arequipa-2015.

El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo principal la determinación del efecto antimicrobiano in vitro de Equisetum giganteum L. (Cola de caballo), sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Candida albicans se realizó en la Universidad Católica de Santa María. Se procedió a realizar las extracciones, las cuales se realizaron por el método de percolación, se trabajó con tres componentes solubles, hexano (disolvente no polar), acetato de etilo, (disolvente polar aprótico) y un solvente hidroalcohólico (disolvente proticó), la identificación de componentes secundarios del extracto hidroalcohólico se realizó mediante cromatografía en capa fina (CCF), para las pruebas antimicrobianas, el procedimiento fue determinado in vitro, las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) por el método de dilución en tubo; las concentraciones bactericidas mínimas (CBM) por el método de siembra en agar, sobre los siguientes microorganismos Gram positivos, Gran negativo y levaduras ya referidos. Se utilizó 12 cepas de cada especie de distinta procedencia, Hospital Honorio Delgado, Laboratorio Suiza Lab. y Laboratorio Llerena Ames, las cuales han sido debidamente identificadas bioquímicamente. Se obtuvo el extracto hidroalcohólico con un mayor porcentaje de rendimiento, presentando un resultado de 46.8 %, en cuanto a la identificación de componentes secundarios, se identificó la presencia de alcaloides, terpenos, flavonoides y taninos. Las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) obtenida para Staphylococcus aureus, es de 3.5 mg/mL, para Escherichia coli es de 15 mg/mL y para Candida albicans es de 3 mg/mL. Así mismo la concentración bactericida mínima (CBM) obtenida para Staphylococcus aureus obtenida, es de 4.5 mg/mL, para Escherichia coli es de 25 mg/mL y para Candida albicans es de 4 mg/mL. Los resultados obtenido mostraron que el extracto hidroalcohólico de Equisetum gigateum L. muestra un mayor efecto antibacteriano frente a bacterias gran positivas como es el caso de Staphylococcus aureus y Candida albicans, en cuanto a bacterias gran negativas muestra un efecto antimicrobiano pero requiere una mayor concentración como es el caso de Escherichia coli la cual presenta menor sensibilidad

Inteligencia emocional y rendimiento académico en estudiantes del VII ciclo de una institución educativa pública, San Ignacio- Cajamarca

El propósito del presente producto de investigación tuvo como finalidad determinar la relación entre la inteligencia emocional y el rendimiento académico en estudiantes del VII ciclo de una institución educativa pública ubicada en la provincia de San Ignacio, Cajamarca. Este tuvo un enfoque cuantitativo, empleando una metodología correlacional con diseño no experimental, de corte transversal. La población de estudio estuvo integrada por 22 educandos de 3ro a 5to de secundaria, con edades entre 14 y 16 años, recolectando evidencia sobre su rendimiento mediante las actas de evaluación, y aplicando un cuestionario de inteligencia emocional, el cual fue sometido a juicios de expertos y aprobada su confiabilidad vía Alfa de Cronbach (valor de 0.82). Los resultados indicaron que, respecto a la percepción de la variable IE, el 24% tuvo un nivel bajo mientras que el 76% un nivel deficiente; así como en la variable RA, el 57% determinó un nivel bajo y el 43% un nivel deficiente. Aunado a ello, se puede aseverar con un 95% de confianza, que existe relación entre las variables; y, al utilizar el coeficiente Rho de Spearman, este expresa un valor de 0.427, lo que ostenta una correlación directa y media en las mismas

Calidad de vida en mujeres con dismenorrea primaria que realizan programas de ejercicios terapéuticos: Revisión Sistemática

Sintetiza la evidencia científica publicada en los últimos 7 años respecto a la influencia de los programas de ejercicios terapéuticos en la calidad de vida de las mujeres con dismenorrea primaria. Mediante una revisión sistemática en PubMed, ScienceDirect y ProQuest durante el período 01/01/2015 – 31/07/2021. La búsqueda sistemática identifico 226 estudios. Sólo 10 estudios reunieron el criterio de elegibilidad. La edad de las participantes estuvo entre 18 y 43 años, la duración de las intervenciones varió entre 8 semanas y 8 meses. La frecuencia de cada sesión estuvo entre 1 vez por semana y diariamente. El ejercicio aeróbico prevaleció en los distintos estudios como tipo de entrenamiento a utilizar, se demostró también que los ejercicios de Kegel y estiramientos tuvieron un efecto significativo. Se concluye que existe evidencia científica que confirma la hipótesis general planteada al inicio del estudio, pero se necesitan más estudios al respecto

Key targets for multi-target ligands designed to combat neurodegeneration

This article is based upon work from COST Action CM1103 “Structure-based drug design for diagnosis and treatment of neurological diseases: dissecting and modulating complex function in the monoaminergic systems of the brain”, supported by COST (European Cooperation in Science and Technology). The authors thank the participants in COST Action for productive collaborations. M. Majekova acknowledges the support of VEGA 2/0033/14, and M. Medina the support of MINECO, Spain (BIO2013-42978-P)Growing evidence supports the view that neurodegenerative diseases have multiple and common mechanisms in their aetiologies. These multifactorial aspects have changed the broadly common assumption that selective drugs are superior to ‘dirty drugs’ for use in therapy. This drives the research in studies of novel compounds that might have multiple action mechanisms. In neurodegeneration, loss of neuronal signaling is a major cause of the symptoms, so preservation of neurotransmitters by inhibiting the breakdown enzymes is a first approach. Acetylcholinesterase (AChE) inhibitors are the drugs preferentially used in AD and that one of these, rivastigmine, is licensed also for PD. Several studies have shown that monoamine oxidase (MAO) B, located mainly in glial cells, increases with age and is elevated in Alzheimer (AD) and Parkinson’s Disease’s (PD). Deprenyl, a MAO B inhibitor, significantly delays the initiation of levodopa treatment in PD patients. These indications underline that AChE and MAO are considered a necessary part of multi-target designed ligands (MTDL). However, both of these targets are simply symptomatic treatment so if new drugs are to prevent degeneration rather than compensate for loss of neurotransmitters, then oxidative stress and mitochondrial events must also be targeted. MAO inhibitors can protect neurons from apoptosis by mechanisms unrelated to enzyme inhibition. Understanding the involvement of MAO and other proteins in the induction and regulation of the apoptosis in mitochondria will aid progress towards strategies to prevent the loss of neurons. In general, the oxidative stress observed both in PD and AD indicate that antioxidant properties are a desirable part of MTDL molecules. After two or more properties are incorporated into one molecule, the passage from a lead compound to a therapeutic tool is strictly linked to its pharmacokinetic and toxicity. In this context the interaction of any new molecules with cytochrome P450 and other xenobiotic metabolic processes is a crucial point. The present review covers the biochemistry of enzymes targeted in the design of drugs against neurodegeneration and the cytochrome P450-dependent metabolism of MTDLs.Publisher PDFPeer reviewe